也可用於 / Also available in:
English (英语)
从临床样品中靶向分析（胞外囊泡）EVs大小和表型，如同大海捞针。尽管如此，流式分析技术仍是一种切实可行方案，并且可实现快速高通量检测。为获得标准并具有可比性的EVs流式分析结果，数据报告和校准对于结果一致性和揭示新的临床发现具有重要意义。
影响EVs检测准确性的因素包括：样品和鞘液界面之间折射率（RI）差异引起的背景散射光，集群检测效应和自发荧光信号等。
来自荷兰阿姆斯特丹大学医学中心Vesicle Observation Center的研究人员为目标EVs检测Protocol设定提出了一些实用建议：
1，不要忽略EV组成成份和其成份特性对RI的影响。在相关研究工作中，通过一款专为纳米颗粒分析优化设计的纳米流式（Apogee A60 Micro，Apogee Flow Systems, UK），比较分析了类似大小，不同材质，不同RI的标准微球（polystyrene , silica和 hollow organosilica）散射光强度。总体而言，散射光强度会随着颗粒大小和样品折射率的增加而增强。用不同材质的不同标准微球来校准，则会产生不同的分析结果。
2，因米氏理论可被用来分析EVs大小和散射光信号的关系，所以使用特征清楚的标准微球做校准，可使数据转化成散射光强度（SI）单位，进而可使来自不同系统不同实验的数据被直接比较分析。
3，EVs的标记荧光强度也可通过转化成等量可溶性荧光分子（MESF）的形式来校准和比较分析。在大多数情况下，推荐使用更亮的染料（如APC和PE），以便获得更好的结果。
有关EV研究标准化更多参考内容，请追踪参考METVES II项目。该项目专注更新整理EV检测流速，散射光和荧光强度标准化相关研究进展。
参考资料：
- Reliable measurements of extracellular vesicles by clinical flow cytometry. Kuiper M, et al. Am J Reprod Immunol. 2020. PMID: 32966654
- Publishable summary METVES II. Project Number: 18HLT01. Euramet. https://www.euramet.org/research-innovation/search-research-projects/details/project/standardisation-of-concentration-measurements-of-extracellular-vesicles-for-medical-diagnoses/. Published 2020, accessed May 18, 2020.
